Salut!
A mai pățit cineva să aibă probleme cu sterilizarea instrumentarului descris în metodologie? Adică, eu am ales o metodă de analiză a unor probe biologice care implică niște instrumente specifice, și acum mă chinui să găsesc protocoale clare pentru sterilizare.
Sincer, nu știu dacă e o problemă specifică domeniului meu (sunt la Bio, master), sau dacă e ceva general valabil pentru orice lucrare experimentală. Am găsit o grămadă de chestii despre sterilizare în spitale, dar parcă nu e chiar același lucru.
Coordonatorul meu a zis să mă documentez mai bine, dar am senzația că mă învârt în cerc. Mă gândeam dacă cineva a mai trecut prin asta și ar putea să-mi dea un pont, sau măcar să-mi spună dacă sunt singurul care se confruntă cu problema asta.
Mă lupt cu partea asta de câteva zile și începe să mă frustreze rău. Mai ales că trebuie să finalizez capitolul de metodologie săptămâna viitoare.
Salut Anton,
Te înțeleg perfect! Nu ești deloc singurul. Sterilizarea instrumentarului pentru cercetare, mai ales în bio, e o bătaie de cap mai mare decât pare la prima vedere. Ai dreptate, protocoalele din spitale sunt orientate spre altceva - acolo e vorba de sterilizare absolută pentru a preveni infecții la pacienți, noi ne concentrăm mai mult pe evitarea contaminării probelor și a rezultatelor.
Și eu am trecut prin asta la master, mai ales când lucram cu culturi celulare. Depinde foarte mult de tipul de analiză pe care o faci și de materialul din care sunt făcute instrumentele. Pentru instrumente care pot fi autoclavate (inox, sticlă borosilicată), autoclavarea e cea mai sigură metodă, dar trebuie să te asiguri că respecti parametrii corecți (temperatura, presiunea, durata) pentru a nu deteriora instrumentele.
Dacă ai instrumente care nu pot fi autoclavate (plastic, unele componente electronice), atunci trebuie să te orientezi spre sterilizare cu radiații UV, etilenoxid (dar asta e mai complicat și necesită echipament special) sau chiar sterilizare prin imersie în alcool de concentrație mare (70-90%), dar asta e mai potrivită pentru suprafețe și nu pentru instrumente cu componente complexe.
Ce tip de instrumente ai tu mai exact? Și ce fel de probe biologice analizezi? Poate dacă îmi dai mai multe detalii, pot să te îndrum spre resurse mai specifice.
În plus, verifică dacă laboratorul unde lucrezi are deja un protocol standard pentru sterilizarea instrumentelor folosite în analize similare. Poate nu e documentat undeva, dar cineva a mai rezolvat problema asta înainte.
Nu te panica, capitolul de metodologie se va finaliza! E normal să te frustrezi, dar cu puțină documentare suplimentară și poate un sfat de la cineva cu experiență, vei găsi soluția potrivită.
Salut Adina,
Mersi mult pentru răspuns! Mă bucur să aud că nu sunt singurul cu problema asta, sincer. Deja începeam să cred că sunt complet depășit.
Ai dreptate, e vorba de evitarea contaminării, nu de sterilizare "medicală". M-am blocat un pic fix în ideea asta.
Instrumentele sunt destul de diverse. Am niște pensete și foarfece chirurgicale din inox, pe care mă gândeam să le autoclavăm, dar am și niște microdisectori cu vârfuri din tungsten, care nu știu cât de bine ar rezista la autoclavare. Apoi, mai am niște plăcuțe Petri din plastic și niște tuburi Eppendorf, evident, astea nu pot la autoclav.
Analizez extracte din țesut vegetal, mai exact studiez compușii secundari. Deci, contaminarea cu bacterii sau fungi ar putea să-mi afecteze serios rezultatele, mai ales că lucrez cu concentrații foarte mici de substanțe.
O să verific și în laborator dacă există vreun protocol, dar nu prea am speranțe. Laboratorul e destul de nou și nu prea există proceduri standardizate pentru tot ce facem.
Radiațiile UV sună bine pentru plastic, o să mă documentez mai bine despre asta. Etilenoxidul pare prea complicat pentru moment, mai ales că nu am acces la echipamentul necesar. Alcoolul de concentrație mare îl folosesc deja pentru dezinfecția suprafețelor, dar nu sunt sigur dacă e suficient pentru instrumente.
Mulțumesc încă o dată pentru sfaturi! Mă ajută enorm să știu că nu sunt singur și că există soluții. O să mai caut și eu, dar dacă mai am vreo întrebare, te voi contacta.
Salut Adina,
Mersi mult pentru răspuns! Mă bucur să aud că nu sunt singurul cu problema asta, sincer. Deja începeam să cred că sunt complet depășit.
Ai dreptate, e vorba de evitarea contaminării, nu de sterilizare "medicală". M-am blocat un pic fix în ideea asta.
Instrumentele sunt destul de diverse. Am niște pensete și foarfece chirurgicale din inox, pe care mă gândeam să le autoclavăm, dar am și niște microdisectori
Salut Adina,
Mersi mult pentru răspuns! Mă bucur să aud că nu sunt singurul care se confruntă cu problema asta, deja începusem să cred că sunt complet depășit. Ai dreptate, e o diferență mare între sterilizarea pentru pacienți și cea pentru laborator.
Eu lucrez cu extracții de ADN și ARN din țesuturi vegetale, deci instrumentele sunt în principal pensete, foarfece, lame, mortar cu pistil... majoritatea din inox, dar am și niște microdisectori cu vârfuri din plastic care nu cred că rezistă la autoclavare.
Autoclavarea e clar opțiunea principală pentru inox, dar mă gândeam dacă e suficientă. Am citit pe undeva că, pentru a evita contaminarea cu ADN/ARN exogen, ar trebui să fie și o etapă de tratare cu DEPC sau etanol, dar nu sunt sigur dacă e necesar în cazul meu.
Radiațiile UV sună bine pentru plastic, dar nu știu cât de eficientă e, mai ales dacă instrumentele au suprafețe complexe. Etilenoxidul e exclus, nu am acces la așa ceva. Iar cu alcoolul... mă tem să nu deteriorez plasticul sau să nu rămână reziduuri care să interfereze cu analizele.
Ce tip de sterilizare ai folosit tu pentru instrumentele din plastic când lucrai cu culturi celulare? Și ai avut probleme cu contaminarea ADN/ARN după sterilizare? Orice sfat ar fi binevenit!
Îmi pare rău că te întreb din nou, dar chiar sunt disperat să finalizez capitolul ăsta.